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2017-08-24 | 活动信息 岛津应用:微芯片电泳MultiNA检测中华鳖蛋白粉中提取的DNA扩增产物

   中华鳖是高蛋白食品,具有滋补身体增强免疫力的功效,然而直接食用中华鳖,其营养吸收率并不高。相比之下,中华鳖蛋白粉更容易被人体吸收,是具有高附加值的营养食品。然而由于中华鳖原料价格昂贵,不法分子容易对其掺假、造假以牟取非法利益。

   分子标记(molecular marker)是一种新的遗传标记方法,它是以 DNA 多态性与性状间的紧密连锁关系为基础的遗传标记。DNA 分子标记是由于缺失、插入、易位、倒位、重排或由于存在长短与排列不一的重复序列等机制而产生的多态性,其本质上是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异特征的DNA 片段,因此,可以实现物种鉴定的目的。这种 DNA 片段是基因组 DNA 经限制性内切酶切割,或作分子杂交后在电泳胶上或检测得到的。由于基因组一般很大,无法进行全面的序列分析,需要针对基因组中个别特征基因片段进行研究,选择合适的分子标记片段是一个关键问题。目前的研究对象以线粒体DNA 的细胞色素 b 基因(Cyt b)和核糖体DNA(rDNA)为主。线粒体 Cyt b 基因具有 相对高的种间差异、较低的种内变异以及相当长的变化序列,因而可通过 Cyt b 鉴别密切相关的物种。

   分子标记技术为中华鳖蛋白粉鉴定提供了新的检测手段,这就需要从蛋白粉中提取合适的 DNA 用于分子标记。然而中华鳖蛋白粉加工工艺精细,所提得的 DNA 结构是否被破坏,最终能否用于 PCR 扩增,即 DNA 分子标记鉴定是否适用中华鳖蛋白粉,是一个需要探讨的课题。为此本文利用改动的试剂盒方法对市售中华鳖蛋白粉进行 DNA 提取,并用通用线粒体细胞色素 b 基因(Cyt b)引物进行 PCR 扩增,微芯片电泳 MultiNA 检测扩增产物。结果表明蛋白粉中可以提取到线粒体细胞色素 b 基因(Cyt b),与从中华鳖肌肉样品中得到的阳性对照样品结果相似,即约 450 bp 的产物。本方法为分子标记技术应用于高附加值产品的鉴定提供了技术基础。


微芯片电泳MultiNA

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