国标解读丨动物毛发MALDI-TOF定性定量检测方法

　　GB/T 42699.2-2023《纺织品 某些动物毛纤维蛋白质组定性和定量分析 第2部分：还原蛋白质多肽分析基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）法》，在2023-08-06正式发布，将在2024-03-01正式实施。该国家标准由 TC209（全国纺织品标准化技术委员会）归口，TC209SC1（全国纺织品标准化技术委员会基础标准分会）执行 ，主管部门为中国纺织工业联合会。

标准概要

　　该标准修改采用ISO国际标准：ISO 20418-2：2018。国际标准是基于岛津MALDI-TOF系统上开发，并在日本发行。

　　国内标准与国际标准的差异其中之一是将国际标准采用的带反射模式（岛津AXIMA Performance），更改为反射模式或线性模式。适用MALDI-TOF机型扩展为线性模式的台式机MALDI-TOF同时适用标准。

　　该标准目的是确立采用MALDI-TOF法测定纺织品中动物毛纤维混合物组分的定性定量方法。

动物毛纤维蛋白质组定性和定量分析MALDI-TOF法原理

　　使用十二烷基磺酸钠（SDS）/二硫苏糖醇（DTT）/磷酸盐缓冲液，提取动物毛发中的蛋白质。提取的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）纯化，再经胰蛋白酶对凝胶中的蛋白质进行酶解。使用MALDI-TOF-MS对物种特异的蛋白质比例进行分析。对照标准曲线计算出混合物中各动物毛纤维的含量。

　　物种特异峰值出现的分子量范围为2450 m/z~2750 m/z，各种动物毛纤维特种峰值在标准中已列出：

　　动物毛发鉴别分析技术在各个领域都起着重要作用。兽毛被用于制作外套、上衣、毛衣等各种纤维制品。制作这样的纤维制品时，有义务根据家庭用品品质标识法对纤维的种类、使用多种纤维时的混用率进行标识。另外，毛发混入食品中时，确定毛发种类对明确混入途径至关重要。

　　经过胰蛋白酶处理的多肽采用MALDI-TOF MS分析。用MALDI-TOF MS检测金属靶板上的结晶样品。调整激光功率等的检测条件，确保在观察动物种类特异性峰值的m/z2450-2750领域能得到良好的分辨率。通过对SDS-PAGE蛋白条带进行胰蛋白酶解后的样品，进行MALDI-TOF MS检测。

　　通过MALDI-TOF MS技术找到山羊绒、羊毛、牦牛毛三者之间的差异峰值区间m/z   2450-2750和特异峰值。如图所示。

MALDI-TOF MS 中的动物物种类特异性峰值

岛津应对方案和机型

岛津台式机MALDI-8020/8030符合标准检测物种特异峰需求

　　台式机主要特点：

　　● 紧凑型台式机

　　● 进样速度快

　　● 长寿命固态激光器

　　● WideBore离子光学技术长期抗污染

　　● TrueClean离子源自动清洁功能

　　● 静音运行（＜55 dB）