Prominence nano
纳升液相色谱仪
高保留时间重复性
蛋白质组分析需要比较不同样本的色谱峰差异，而样本中又存在许多特征相似的多肽，对保留时间的重复性要求非常高。Prominence nano系统的高重复性可保证蛋白质组分析的高精数据，配置了RFC系统的LC-20AD nano可以在流速为300 nL/min获得RSD不超过0.2% 的保留时间重复性。
牛血清白蛋白（BSA）酶解样品的重复性
2维 LC的高分辨率
牛血清白蛋白（BSA）酶解样品的重复性
在蛋白质组学分析时，单一的1D反相分离不足以提供足够的色谱峰容量；所以，为了实现复杂样品的分离，需要进行2D分离以保证足够的峰容量。Prominence nano系统可以进行2D分析，结合阳离子交换和反相模式，为蛋白质组学分析提供所需的核心技术。下图为200fmol酵母蛋白质的分析图，1D分离中的未分离组分在2D中继续分离成几个组分，2D分离的峰容量大大大于1D所获得的效果。
分析条件
一维
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柱 |
PolysulfoethylA (50mmL.×1mmI.D.) |
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流动相 |
甲酸铵缓冲液 |
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流速 |
40 nL/min |
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捕集柱 |
(5 mmL.×300 m I.D.) |
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捕集时长 |
5分钟 |
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脱盐溶剂 |
水/蚁酸=100/0.1 |
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脱盐流速 |
L/min |
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脱盐时长 |
5分钟 |
2维
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柱 |
PicoFrit (100 mmL.×75 m I.D.) |
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流动相 |
梯度洗脱 |
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流速 |
600nL/min |
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温度 |
温度 |
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检测 |
LCMS-IT-TOF |
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样本 |
酵母蛋白中的蛋白 |
* 分别利用1维和2维中不同类型的柱体进行其他组合的分离模式也是可行的。在这种情况下，分离或检测方法由于使用的移动相分离模式或类型之间的相互作用，可能会有一些限制。
连接MALDI-TOFMS使用
Prominence nano系统不仅仅可以通过nano ESI接口连接LCMS使用，还可连接到配有自动点靶仪的MALDI-TOFMS仪器。为了准确分析MALDI靶的每个色谱峰，需要LC能够在1nL到1µL范围之内更准确地控制流速，Prominence nano系统能够满足此需要。
酶解BSA样品的UV色谱图（500fmol）
分析条件
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检测器 |
UV220 nm |
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柱 |
MonoCap for Fast-flow 快速MonoCap |
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流动相 |
1、水/乙腈/蚁酸=98/2/0.1(v/v) B) 水/乙腈/蚁酸=5/95/0.1(v/v) |
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流速 |
1 µL/min |
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温度 |
环境温度 |
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捕捉柱 |
ODS (1 mmL. × 0.5 mm I.D.) |
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点靶间隔 |
12 秒的点断 |